不含硫酸的TMB终止液
1、应用：ELISA。使用方法：ELISA显色终止步骤包括： 显色阶段，每孔加入TMB显色液100μL，孵育后溶液渐变蓝。 终止阶段，每孔加入TMB显色终止液（450nm）各100μL，溶液转变为黄色。 检测阶段，使用酶标仪检测OD450或OD450/630。
2、在ELISA实验中，以TMB（四甲基联苯胺）作为底物，其反应过程如下：首先，将TMB与过氧化氢脲溶液混合，HRP（过氧化氢酶）在此环境下发挥作用，催化反应生成蓝色的阳离子根。这个过程中，酶的催化活性至关重要。然而，当加入终止液时，情况发生了变化。
3、酶联物，蓝色液体，主要成分为HRP标记羊抗人IgG抗体，含防腐剂，规格为6/12ml。20倍浓缩洗涤液，无色液体，主要成分为磷酸盐缓冲液和吐温-20，规格为15/50ml，使用前需按照1：19比例稀释。底物液TMB，无色液体，主要成分为TMB，规格为6/12ml。
4、包被：将抗体稀释在碳酸盐缓冲液（1～10μg/ml）中，每孔0.1ml，4℃过夜，次日洗涤。加样：待测样本加入反应孔，37℃孵育1小时，洗涤后加酶标抗体。酶标抗体孵育后，加TMB底物显色，再用硫酸终止反应，结果根据颜色深浅判断。
5、题主是否想询问“什么底物加终止液后颜色变黄”？酶底物。人Calreticulin定量EIA试剂加入酶标抗体，形成免疫复合物连接在板上，加入酶底物TMB，会出现蓝色，加终止液，颜色变黄，在450nm处测OD值，Calreticulin浓度与OD值成正比。
