慢病毒细胞
1、慢病毒细胞转染是指利用慢病毒作为载体，将某种外源基因和重组质粒等DNA分子导入到目标细胞中的一种技术手段。慢病毒可以带有细胞进入人体细胞内，随后融入宿主细胞的DNA中。此种技术应用广泛，可以用于基因治疗、基因表达等研究中。
2、当细胞在感染慢病毒48小时后，经过嘌呤霉素处理48小时，观察到几乎无细胞死亡现象，这表明转染过程较为成功。为了解决细胞密度过高问题，建议在进行药筛之前，先消化细胞并重新铺板或传代，这样能够保证被有效转染的细胞能够贴附于培养皿上。
3、慢病毒相较于腺病毒在实验中有其独特的优势，具体取决于实验需求。首先，慢病毒的转染效率较高，这意味着在实验中更容易成功实现基因传递。其次，慢病毒能够实现稳定转染，而腺病毒则为瞬时转染，这在需要长期观察基因表达情况的实验中显得尤为重要。
4、慢病毒转染技术基于HIV病毒特性，通过将目的基因插入病毒颗粒中，实现高效细胞基因转染。实验过程中，首先在293T细胞中转染三个质粒，这些质粒分别包含HIV病毒合成所需组件，其中一个质粒携带装配入病毒衣壳信号序列，并整合了需要稳定的序列。经过24小时，病毒颗粒形成，携带了稳定序列的假病毒在细胞间扩散。
5、构建慢病毒稳转细胞株的流程主要分为稳定表达和慢病毒感染两个部分。稳定表达是指将外源DNA整合到宿主染色体上，使细胞长期表达目的基因，适用于重组蛋白和抗体生产、基因编辑、功能性研究等应用。相比之下，瞬时表达的外源DNA不会整合到宿主染色体中，通常只能维持几天。
